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丙型肝炎的實(shí)驗(yàn)室檢測

2012-09-21 14:26 閱讀:1918 來源:愛愛醫(yī) 責(zé)任編輯:潘樂樂
[導(dǎo)讀] (一)血清生化學(xué)檢測 ALT、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平變化可反應(yīng)肝細(xì)胞損害程度,但ALT、AST水平與HCV感染引起的肝組織炎癥分度和病情的嚴(yán)重程度不一定平行;急性丙型肝炎患者的ALT和AST水平一般較低,但也有較高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝

    (一)血清生化學(xué)檢測

    ALT、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平變化可反應(yīng)肝細(xì)胞損害程度,但ALT、AST水平與HCV感染引起的肝組織炎癥分度和病情的嚴(yán)重程度不一定平行;急性丙型肝炎患者的ALT和AST水平一般較低,但也有較高者。急性丙型肝炎患者的血清白蛋白、凝血酶原活動(dòng)度和膽堿酯酶活性降低較少,但在病程較長的慢性肝炎、肝硬化或重型肝炎時(shí)可明顯降低,其降低程度與疾病的嚴(yán)重程度成正比。

    慢性丙型肝炎患者中,約30%ALT水平正常,約40%ALT水平低于2倍正常值上限。雖然大多數(shù)此類患者只有輕度肝損傷,但有部分患者可發(fā)展為肝硬化。ALT水平下降是抗病毒治療中出現(xiàn)應(yīng)答的重要指標(biāo)之一。凝血酶原時(shí)間可作為慢性丙型肝炎患者病情進(jìn)展的監(jiān)測指標(biāo),但迄今尚無一個(gè)或一組血清學(xué)標(biāo)志可對(duì)肝纖維化進(jìn)行準(zhǔn)確分期。

    (二)抗-HCV檢測

    抗-HCV酶免疫法(EIA)適用于高危人群篩查,也可用于HCV感染者的初篩。但抗-HCV陰轉(zhuǎn)與否不能作為抗病毒療效的指標(biāo)。用第三代EIA法檢測丙型肝炎患者,其敏感度和特異度可達(dá)99%,因此,不需要用重組免疫印跡法(RIBA)驗(yàn)證。但一些透析、免疫功能缺陷和自身免疫性疾病患者可出現(xiàn)抗-HCV假陽性,因此,HCV RNA檢測有助于確診這些患者是否合并感染HCV。

    (三)HCV RNA檢測

    在HCV急性感染期,在血漿或血清中的病毒基因組水平可達(dá)到105~107拷貝/ml。在HCV慢性感染者中,HCV RNA水平在不同個(gè)體之間存在很大差異,變化范圍在5×104~5×106拷貝/ml之間,但同一名患者的血液中HCVRNA水平相對(duì)穩(wěn)定。

    1.HCV RNA定性檢測:對(duì)抗-HCV陽性的HCV持續(xù)感染者,需要通過HCV RNA定性試驗(yàn)確證。HCV RNA定性檢測的特異度在98%以上,只要一次病毒定性檢測為陽性,即可確證HCV感染,但一次檢測陰性并不能完全排除HCV感染,應(yīng)重復(fù)檢查。

    2.HCV RNA定量檢測:定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)、分支DNA(bDNA)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR法均可檢測HCV RNA病毒載量。國外HCV RNA定量檢測試劑盒有PCR擴(kuò)增的Cobas V2.0、SuperQuant、LCx HCV RNA定量分析法等,但bDNA的Versant HCVRNA 2.0和3.0定量分析法應(yīng)用較為廣泛。國內(nèi)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR法已獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)的正式批準(zhǔn)。不同HCV RNA定量檢測法可用拷貝/ml和IU/ml兩種表示方法,兩者之間進(jìn)行換算時(shí),應(yīng)采用不同檢測方法的換算公式,如羅氏公司Cobas V2.0的IU/ml與美國**遺傳學(xué)研究所的SuperQuant的拷貝數(shù)/ml換算公式是:IU/ml=0.854×拷貝數(shù)/ml+0.538。

    HCV病毒載量的高低與疾病的嚴(yán)重程度和疾病的進(jìn)展并無絕對(duì)相關(guān)性,但可作為抗病毒療效評(píng)估的觀察指標(biāo)。在HCV RNA檢測中,應(yīng)注意可能存在假陽性和假陰性結(jié)果。

    (四)HCV基因分型

    HCV RNA基因分型方法較多,國內(nèi)外在抗病毒療效考核研究中,應(yīng)用Simmonds等1~6型分型法最為廣泛。HCV RNA基因分型結(jié)果有助于判定治療的難易程度及制定抗病毒治療的個(gè)體化方案。


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