抗病毒藥物如核苷（酸）類似物（Nucs）或干擾素（IFN）-α可以迅速抑制乙型肝炎病毒（HBV）的**，從而減少纖維化的進(jìn)展和肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)生。

    盡管局部或全身化療可治療腫瘤，但手術(shù)切除或肝移植仍是治療HCC的最有效方法。需進(jìn)行綜合性治療以預(yù)防乙肝相關(guān)性肝癌的發(fā)生和術(shù)后復(fù)發(fā)的觀點(diǎn)已得到廣泛認(rèn)知。

    南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院的研究人員綜述了HBV誘導(dǎo)肝癌的機(jī)制，并討論了抗HBV的治療趨勢，及其預(yù)防肝癌發(fā)生和復(fù)發(fā)的作用。該綜述發(fā)表在2013年12月的WorldjournalofGatraoenterology上。

    摘要

    慢性乙肝病毒感染是肝臟疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素，可以導(dǎo)致肝功能不全、肝硬化和肝細(xì)胞癌?？共《局委熤荚谝种苹蛳鼿BV**，減少肝炎活動，從而減少或減緩肝臟疾病的進(jìn)展。

    核苷（酸）類似物可快速抑制HBV**，使血清轉(zhuǎn)氨酶正?；?，恢復(fù)肝功能，從而延長肝功能失代償患者的生存周期。長期核苷（酸）類似物治療可改善肝組織學(xué)，逆轉(zhuǎn)肝纖維化，減少疾病進(jìn)展。

    干擾素（IFN）-α治療可帶來長遠(yuǎn)利益，包括持續(xù)和累積的病毒學(xué)反應(yīng)、乙肝表面抗原（HbsAg）血清清除以及減少肝硬化和/或肝癌的發(fā)生。

    聚乙二醇化干擾素（PEG-IFN）和更新的Nucs藥物的長期效果可能更好，因為它們的功效已經(jīng)得到改善，且產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險較低。但是這些藥物的療效還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能令人滿意。

    另外，對于肝癌切除或肝移植術(shù)后HBV治療對肝癌發(fā)病率和復(fù)發(fā)的影響，仍需要進(jìn)一步的研究探討。

    HBV感染誘導(dǎo)慢性炎癥和癌癥發(fā)生

    乙型肝炎病毒（HBV）是嗜肝病毒家族的成員，全球有超過20億人感染HBV。HBV在肝細(xì)胞中**，感染者發(fā)生HCC的風(fēng)險是非感染者的10-100倍。肝細(xì)胞癌（HCC）增加了這些患者的發(fā)病率和死亡率。

    HBV可在永生化的肝細(xì)胞中持續(xù)**，并且不出現(xiàn)明顯的細(xì)胞損傷或死亡，這表示該病毒不能直接導(dǎo)致細(xì)胞病變。肝炎的發(fā)病機(jī)制是免疫介導(dǎo)的，肝炎引發(fā)炎癥反應(yīng)造成肝損傷，這一反應(yīng)主要由非實(shí)質(zhì)細(xì)胞（NPC）參與，如髓系的枯否（Kupffer）細(xì)胞和肝星狀細(xì)胞。

    Toll樣受體核因子（NF）-κB信號激活可能引發(fā)現(xiàn)天性免疫應(yīng)答，從而抑制病毒在HBV轉(zhuǎn)基因小鼠中的**。NPC分泌的NF-κB可調(diào)節(jié)肝有絲分裂原[如腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素（IL-6）和肝細(xì)胞生長因子]，因而促進(jìn)了靜態(tài)肝細(xì)胞的代償性增生。

    這些代償性增生的肝細(xì)胞攜帶有HBV誘導(dǎo)的突變，基因突變轉(zhuǎn)移到子細(xì)胞中，從而促進(jìn)肝腫瘤的進(jìn)展。

    肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）的自分泌可誘導(dǎo)細(xì)胞存活和增殖，但不造成肝臟損傷，也與NPC-介導(dǎo)的肝有絲分裂原分泌無關(guān)。

    代償性增殖會導(dǎo)致不典型增生、腺瘤和肝癌的形成?？傊?，NF-κB活化相關(guān)的致癌作用機(jī)制可能依賴于下游肝絲裂原的釋放和代償性增殖。

    HBVX（HBx）蛋白是由乙肝病毒開放讀碼框編碼的最小蛋白，有154個氨基酸，分子量約17.5kDa。HBx蛋白可定位到線粒體，作為一個適配器或激酶激活劑影響信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，這可能是HBx蛋白發(fā)揮多重功能的統(tǒng)一機(jī)制。影響如蛋白激酶C，JAK/STAT的激活劑，SAPK/JNK，RAS-RAF-MAPK，ERK等的轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期調(diào)控和凋亡。

    此外，據(jù)報道HBx蛋白能夠直接激活NF-κB通路，其的機(jī)制可能是通過上調(diào)NF-κB激酶活性抑制劑和雷帕霉素蛋白（mTOR）途徑。

    如上所述，各種炎性細(xì)胞因子，包括TNF-α，、IL-1α、IL-1β、IL-6和IL-8在肝臟炎癥和癌變中起到重要作用。這些細(xì)胞因子都是NF-κB介導(dǎo)活化的，其中IL-6最重要。最近研究發(fā)現(xiàn)，IL-22也可以通過STAT3的活化促進(jìn)肝癌發(fā)生，這表明炎性細(xì)胞因子作為炎癥與肝癌的中介已得到了相當(dāng)多的關(guān)注。

    HBx蛋白還可通過其它炎性細(xì)胞干擾抗腫瘤的免疫應(yīng)答。受感染的肝組織內(nèi)自然殺傷（NK）細(xì)胞可誘導(dǎo)細(xì)胞溶解但無IFN-γ產(chǎn)生。這表明肝細(xì)胞的死亡無法清除病毒。

    樹突狀細(xì)胞也可能感染HBV，這將導(dǎo)致有缺陷的慢性HBV感染和較差的適應(yīng)性免疫。CD4+CD25+**3P+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可以通過HBx的**誘導(dǎo)產(chǎn)生TGF-β1，并且它們與Th17細(xì)胞的相互作用也有助于在肝臟中形成免疫耐受和清除平衡。

    乙肝相關(guān)性腫瘤發(fā)生機(jī)制

    越來越多的證據(jù)表明，乙肝病毒可通過直接調(diào)節(jié)途徑促進(jìn)肝細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。首先，乙肝病毒的插入與大量的宿主遺傳變異有關(guān)，如缺失、重復(fù)和染色體易位。

    這些事件既可以誘導(dǎo)染色體表達(dá)或功能的改變，還可有助于產(chǎn)生染色體不穩(wěn)定性。例如，HBx基因片段的插入（316-462/262-462bP）可直接使人類正常肝L02細(xì)胞變換為永生細(xì)胞模型。

    此外，在44份臨床HBV陽性的肝癌組織中有5份檢測到基因整合。在宿主基因特異位點(diǎn)的整合可能有助于產(chǎn)生有生長優(yōu)勢的克隆細(xì)胞群，但隨后額外的突變會發(fā)生累積。

    在兩個***的肝癌組織中，研究人員發(fā)現(xiàn)視黃酸受體和細(xì)胞周期蛋白A為乙肝病毒整合的目標(biāo)。最近，更多參與細(xì)胞存活、增殖和永生化的基因也被報告為乙肝病毒整合的目標(biāo)。如人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT，端粒酶的調(diào)節(jié)器）、血小板衍生生長因子受體、鈣信號傳導(dǎo)相關(guān)基因、核糖體蛋白基因等。

    雖然有研究顯示HBx蛋白和HBVS蛋白的表達(dá)上調(diào)，與轉(zhuǎn)基因小鼠模型中肝癌的發(fā)生率相關(guān)，但其具體機(jī)制仍不清楚。

    值得注意的是，在肝硬化的肝臟中肝細(xì)胞增殖率是下降的。**性衰老表型占主導(dǎo)地位，特點(diǎn)是端?？s短和細(xì)胞周期永久停滯。肝細(xì)胞增生率低或無端粒酶活性與HBx或前-S2蛋白的上調(diào)相關(guān)。

    在一項包括55名肝癌患者和17名慢性肝炎患者的研究中，81%的肝癌患者端粒酶陽性，而且與慢性肝炎患者相比，肝癌患者的平均端粒長度明顯縮短。

    HBx蛋白可通過干擾有絲分裂的主要關(guān)卡使染色體不穩(wěn)定，可誘導(dǎo)表觀遺傳變化，包括DNA甲基化畸變、組蛋白修飾和miRNA的表達(dá)。

    Jiang等報道，在男性患者中miR–22表達(dá)量的增加與肝癌發(fā)展相關(guān)。Xu等研究認(rèn)為：HBx激活可抑制miR-148A從而增加腫瘤的發(fā)生率。

    此外，HBx蛋白可與p53結(jié)合使后者失活，并與DNA損傷結(jié)合蛋白1（DDB1，DNA修復(fù)蛋白質(zhì)）相互作用，從而影響DNA的修復(fù)功能，使遺傳改變累積，產(chǎn)生耐藥性突變和抗腫瘤藥物的突變。

    抗病毒藥物治療現(xiàn)狀

    過去十年中，抗HBV治療得到顯著改善。目前治療慢性HBV感染是基于兩種不同的策略：（1）IFN-α或者胸腺素-A1（T-A1），旨在誘導(dǎo)產(chǎn)生持續(xù)的抗病毒反應(yīng)。（2）口服抗乙肝病毒的核苷（酸）類似物，實(shí)現(xiàn)對HBV**的長期完全抑制。

    第一種策略通常在輕度肝病患者中使用，這些患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）很高，HBVDNA**率不高。這種治療在年輕患者和那些感染HBV基因型A或B的患者中特別成功。

    T-a1是一種免疫調(diào)節(jié)劑，它可以觸發(fā)淋巴細(xì)胞和T細(xì)胞功能的成熟，并促進(jìn)免疫缺陷重建和HBV**相關(guān)疾病的緩解。在乙肝患者e抗原（HBeAg）陽性的慢性B型肝炎中終止病毒**，且無顯著副作用。

    18例HBeAg陽性和血清HBVDNA陽性的慢性乙肝患者接受6個月的T-A1治療（皮下注射1.6mg，每周兩次）。30例患者接受6個月的3-5MUIFN-α治療（前15天每日皮下注射1，之后改為每周注射三次）。

    接受T-A1治療的患者取得了較好的HBV載量的減少和血清轉(zhuǎn)換結(jié)果，結(jié)果表明，T-A1對抗-HBe和HBVDNA陽性的患者效果良好。

    向IFN-α2b中加入12-kDa的線性聚乙二醇（PEG），或向INF-α2a中加入40-kDa的PEG，使得干擾素的注射周期已從每天或每周三次延長到每周一次，從而明顯改善了藥物的耐受性和易用性。

    此外，對于HBeAg陽性的慢性乙型肝炎患者，使用聚乙二醇化干擾素（PEGIFN-α2a）的療效比拉米夫定更好，主要體現(xiàn)在HBeAg血清轉(zhuǎn)換、HBVDNA抑制和B型肝炎表面抗原（HBsAg）的血清轉(zhuǎn)化。

    總體而言，PEGIFN-α是HBeAg陰性的慢性乙肝患者的一種理想治療選擇。由于其安全性和抗病毒活性的機(jī)制獨(dú)特，從而可產(chǎn)生長期持久的免疫控制。

    對于***BVDNA水平的患者，以及伴隨有嚴(yán)重肝臟疾病、干擾素治療失敗或不能耐受的患者，一般主要使用核苷（酸）類似物進(jìn)行治療。

    這一療法主要的限制性在于耐藥性的產(chǎn)生：如拉米夫定（L-核苷）治療5年后，76%的患者出現(xiàn)耐藥。替比夫定（另一種L-核苷）略強(qiáng)于拉米夫定，治療2年后，HBeAg陽性患者耐藥率為25%，HBeAg陰性患者耐藥率為11%。

    阿德福韋是一種無環(huán)膦酸鹽，抗病毒能力相對較弱，但對拉米夫定和替比夫定耐藥性突變的病毒有效。使用的方式應(yīng)為聯(lián)合用藥，而非取代。阿德福韋耐藥發(fā)展相對緩慢，在HBeAg陰性的患者中使用阿德福韋5年后，耐藥性上升到29%。但單獨(dú)使用時耐藥突變產(chǎn)生更快。

    目前兩個一線Nucs藥物分別是恩替卡韋和替諾福韋。恩替卡韋是非常有效的抗病毒藥物，5年后94%的患者HBVDNA降低到檢測線以下，而耐藥性只有1.2%。

    替諾福韋抗病毒活性更強(qiáng)大，且與阿德福韋相比腎毒性較小。它可單獨(dú)使用，且對拉米夫定耐藥突變有效。使用替諾福韋3年或更長的時間不產(chǎn)生耐藥性。

    總之，對于HBeAg陽性的慢性乙肝患者，PEGIFN-α提供了優(yōu)越的療效，有較好的HBeAg血清轉(zhuǎn)換、HBVDNA抑制和HBsAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換。新的治療方案中PEGIFN-α和第三代Nucs如恩替卡韋或替諾福韋，可增加HBsAg清除速率。

    抗病毒治療抑制慢性炎癥發(fā)展為癌癥

    一項隨訪11年的前瞻性隊列研究表明，HBVDNA濃度>104拷貝/mL是30歲以上人群出現(xiàn)肝癌風(fēng)險的一個預(yù)測指標(biāo)，且與血清ALT水平無關(guān)?？梢钥隙ǖ氖?，抗乙肝病毒治療可改善慢性HBV感染的臨床結(jié)局，特別是在肝癌的發(fā)病率方面。

    **一項包括101例男性患者的隨機(jī)對照試驗中，IFN-α治療組比對照組的肝癌累積發(fā)生率顯著下降。

    此外，一項回顧性研究表明：與安慰劑組相比，天然類淋巴母細(xì)胞IFN-α（IFN-αNL）和IFN療法在HBV清除、減少肝癌發(fā)生、延長生存期等方面可能會取得更有利的長期影響。

    在一項有關(guān)Nucs長期利益的隨機(jī)對照試驗中，拉米夫定治療組的肝癌發(fā)生率為3.9%，而對照組發(fā)生率為7.4%（HR=0.49）。

    在656例HBeAg陰性患者中（54%有慢性肝炎，30%有肝硬化），拉米夫定治療組（中位數(shù)22月）可有效減少病毒載量，降低肝癌發(fā)展和肝硬化患者的疾病惡化。

    一項韓國研究還表明，在代償期肝硬化患者中，與未經(jīng)治療的病人相比，拉米夫定治療組的HCC發(fā)生率（4.9%）顯著減少。

    最近一項系統(tǒng)性回顧研究也表明，與未經(jīng)治療的患者相比，經(jīng)過核苷（酸）類似物治療的患者肝癌發(fā)生率較?。?.8%對6.4%）。

    一項對比IFN和核苷（酸）類似物療法效果的系統(tǒng)評價顯示，IFN-α或核苷（酸）類似物治療可顯著降低肝癌風(fēng)險。

    干擾素在肝硬化患者中受益更大，而Nucs則在那些非肝硬化和HBeAg陽性的患者中獲得更大受益。這兩種治療方法都可以持續(xù)抑制HBV的**，從而以減少肝癌的發(fā)生率。

    抗病毒治療對HCC復(fù)發(fā)的影響

    抗乙肝病毒治療是否能在部分肝切除術(shù)或肝移植后有效地減少肝癌的復(fù)發(fā)風(fēng)險？之前研究表明，早期肝癌患者的5年總生存率為58%（其中肝移植術(shù)后為63%；肝臟部分切除術(shù)后為53%）。

    Huang等研究表明，患者肝切除術(shù)后如果出現(xiàn)HBV再激活，會有較高的幾率發(fā)生肝衰竭，并且3年無病生存率和總生存率較低（比例分別為11.8%對6.4%，34.1%比46.0%，51.6%比67.2%）。

    探索性亞組分析顯示，輔助IFN-α對pTNM分期Ⅰ/Ⅱ期腫瘤無生存獲益（兩個組5年存活率均在90%左右），但可以防止腫瘤的早期復(fù)發(fā)，使Ⅲ/ⅣA腫瘤患者的5年生存期由24%提高到68%。

    Lee等人也報道，腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1陽性患者肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)率為28%，PEGIFN組整體累積復(fù)發(fā)率顯著低于對照組，1年和2年累積生存率也分別高于對照組（100%對93%和100%對87%）。

    在一項包括237例肝癌切除術(shù)后HCC患者的報告中，IFN-α組的中位總生存期為63.8月，安慰劑組為38.8月，中位無病生存期分別為31.2月與17.7月。

    Chen等人的結(jié)果則表明，佐劑IFN-α2b的治療并沒有減少術(shù)后病毒性肝炎相關(guān)的肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)。

    關(guān)于Nucs對肝癌復(fù)發(fā)的效果，安塞爾莫等認(rèn)為，乙肝免疫球蛋白（HBIG）和拉米夫定治療可以顯著降低乙肝復(fù)發(fā)率，顯著提高肝移植術(shù)后1年和3年無復(fù)發(fā)生存率。

    Chan等人也報道，拉米夫定或恩替卡韋治療患者的1年、3年和5年無病生存率分別為66.5%，51.4%、51.4%和48.9%，、33.8%、33.8%。

    Kubo等報道，拉米夫定治療組的切除后無瘤生存率顯著高于對照組。最近一項多因素分析顯示，移植后HCC復(fù)發(fā)與乙肝病毒再感染有關(guān)，乙肝免疫球蛋白與不良預(yù)后相關(guān)。

    本文作者所在的南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝臟移植中心研究結(jié)果表明，HBVDNA拷貝數(shù)>104/mL或103-104/mL可使HBsAg陽性患者肝臟功能受損，必須在根治性手術(shù)后采取拉米夫定。

    此外，對于那些有YMDD變異的乙肝患者而言，恩替卡韋和/或阿德福韋酯應(yīng)該被用作初始治療的替換方案。如果出現(xiàn)耐藥性，還可以使用富馬酸替諾福韋酯。

    一項隨機(jī)對照臨床研究證實(shí)，對于接受部分肝切除和肝移植的患者，標(biāo)準(zhǔn)化的抗乙肝病毒治療可顯著提高療效，降低復(fù)發(fā)率。

    結(jié)論

    本文從兩個不同方面描述了慢性HBV感染引起腫瘤發(fā)生的機(jī)制：通過HBVDNAHBx蛋白直接誘導(dǎo)宿主DNA不穩(wěn)定，以及HBV感染相關(guān)的肝臟炎癥和免疫調(diào)節(jié)失衡。

    文章還簡要介紹了當(dāng)前對HBV感染的治療方法，同時表明，在慢性HBV感染中及時使用Nucs和免疫調(diào)節(jié)劑，可以防止包括肝癌在內(nèi)的疾病進(jìn)一步惡化。

    長期研究表明新的抗病毒藥物如恩替卡韋、替諾福韋和替比夫定，可能比拉米夫定更能減緩疾病的進(jìn)展。對于接受肝切除或肝移植的患者，腫瘤復(fù)發(fā)必須通過超聲和α-胎蛋白來監(jiān)視。

    同時更重要的是，以我們的經(jīng)驗來看，還應(yīng)進(jìn)行HBV**情況的監(jiān)測。因為持續(xù)的乙肝病毒激活或再激活與肝癌發(fā)展或復(fù)發(fā)顯著相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)化的抗HBV治療最終可延緩肝癌復(fù)發(fā)和生存效益。

    PEG-IFN為抑制沒有肝硬化或纖維化患者的HBV病毒**提供了一個更好的機(jī)會，，從而也為降低患者肝癌的發(fā)展和復(fù)發(fā)提供了廣闊的前景。

    雖然在許多第三世界國家，拉米夫定仍是一線藥物，但未來可以大規(guī)模使用新開發(fā)的干擾素，從而展現(xiàn)更美好的前景。

    總之，開發(fā)安全有效且在承受范圍內(nèi)的藥物，維持可抑制乙肝病毒**的治療措施，應(yīng)該是慢性HBV感染治療的最終目標(biāo)。