最近,成都中醫(yī)藥大學、都江堰醫(yī)學中心和成都諾恩生物科技有限公司(Nuoen)的研究人員,開發(fā)出一種最新的miRNA檢測方法,可以幫助我們把microRNA轉(zhuǎn)變成為強大的診斷標志物,并減少不適當?shù)目股靥幏健?br />
作為各種各樣疾病的一種重要調(diào)節(jié)分子,microRNAs(miRNAs)用作非侵入性診斷生物標志物,已經(jīng)顯示出巨大的潛力,可能有一天被用于早期診斷和預后。然而,目前還沒有一種miRNAs檢測方法已被證明足夠可靠地應用于臨床。
這種新的miRNA檢測方法——命名為miRNA衍生片段長度多態(tài)性(miRFLP),可以快速、準確地驗證體液標本中的miRNA標記,以用于臨床設置的疾病診斷。這一研究結(jié)果發(fā)表在最近的Nature子刊《Scientific Reports》。
本研究負責人徐凱(Kai Xu)指出:“相比較其他方法,miRFLP法為我們提供了一種可靠的miRNA檢測方法,是唯一能夠在不同種類粗樣品中直接檢測microRNA拷貝數(shù)的方法。這使我們能夠在24小時的時間框架內(nèi),為患者提供測試結(jié)果。”
徐凱的研究小組發(fā)現(xiàn),特定的miRNA往往通過在血液和其他體液中上調(diào)或下調(diào),而反應各種不同的疾病。利用miRFLP技術(shù),該實驗室將可以將目標miRNA與合成RNA spike-ins組合,同時轉(zhuǎn)換成不同大小的DNA片段。通過同時測量miRNA和RNA spike-ins,實驗室可以從少量未純化的血液樣本中,直接獲得目標miRNA拷貝。
通過實驗,該研究團隊最終發(fā)現(xiàn),只需要0.2毫升的血清,就能精確地檢測出低至每個樣本中一個拷貝的目標miRNA數(shù)量。
徐凱解釋說:“不同于其他的方法,我們利用PCR來同時擴增所有信號,利用毛細管電泳技術(shù)檢測不同大小的片段及其熒光。我們用它來制作一個標準曲線,并測定每個目標microRNA數(shù)量,其余部分是一個程序,將它們轉(zhuǎn)換為真實副本。”
新的方法能提供一個有價值的非侵入性替代方法,很快檢測器官損傷、癌癥、糖尿病和許多其他疾病。根據(jù)徐凱介紹,miRFLP的第一個臨床試驗,將與哮喘密切相關(guān)的microRNA表達上調(diào),與患者細菌或病毒感染相關(guān)的microRNA區(qū)分開來。
徐凱說:“用一滴血,我們就可以告訴你是否患有哮喘、細菌感染或病毒感染。我們的測試法將給病人帶來很多好處,并避免濫用抗生素,這是一個全球問題。”
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