資訊|論壇|病例

搜索

首頁(yè) 醫(yī)學(xué)論壇 專(zhuān)業(yè)文章 醫(yī)學(xué)進(jìn)展 簽約作者 病例中心 快問(wèn)診所 愛(ài)醫(yī)培訓(xùn) 醫(yī)學(xué)考試 在線題庫(kù) 醫(yī)學(xué)會(huì)議

您所在的位置:首頁(yè) > 資訊頭條 > DNA測(cè)序界還在等待納米孔測(cè)序技術(shù)的到來(lái)

DNA測(cè)序界還在等待納米孔測(cè)序技術(shù)的到來(lái)

2014-03-06 10:26 閱讀:1200 來(lái)源:生物360 責(zé)任編輯:李思杰
[導(dǎo)讀] 美國(guó)佛羅里達(dá)州的Marco島(Marco Island, Florida)是基因組測(cè)序者們的圣地,十幾年來(lái),這里每年都會(huì)舉行一次基因組測(cè)序盛會(huì),全世界的基因組測(cè)序儀制造商們都會(huì)在會(huì)上拿出他們最先進(jìn)的技術(shù)和產(chǎn)品,其中有很多都是***性的創(chuàng)新技術(shù)。最近最吸引人的就是英國(guó)

    美國(guó)佛羅里達(dá)州的Marco島(Marco Island, Florida)是基因組測(cè)序者們的圣地,十幾年來(lái),這里每年都會(huì)舉行一次基因組測(cè)序盛會(huì),全世界的基因組測(cè)序儀制造商們都會(huì)在會(huì)上拿出他們最先進(jìn)的技術(shù)和產(chǎn)品,其中有很多都是***性的創(chuàng)新技術(shù)。最近最吸引人的就是英國(guó)牛津納米孔技術(shù)公司(Oxford Nanopore Technologies)在兩年前發(fā)布的技術(shù),他們能夠進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)序,而且擁有非常長(zhǎng)的讀長(zhǎng),這項(xiàng)技術(shù)只需要讓待測(cè)DNA分子通過(guò)一個(gè)納米級(jí)的孔道就行了(Science, 4 May 2012, p. 534),在此之前很多人都認(rèn)為這是不可能完成的任務(wù)。牛津納米孔技術(shù)公司表示他們會(huì)盡快推出原型機(jī),讓廣大科研工作者都享受到技術(shù)進(jìn)步帶來(lái)的便利。

    經(jīng)過(guò)了兩年多的沉寂,他們最終給出了答卷。雖然該公司并沒(méi)有派人參加這次的大會(huì),但是據(jù)一位與該公司有合作的科研人員介紹,他們已經(jīng)用這種新技術(shù)對(duì)一種細(xì)菌進(jìn)行了基因組測(cè)序,而他本人也使用測(cè)序結(jié)果組裝出了細(xì)菌的完整基因組序列。并且牛津納米孔技術(shù)公司也在積極兌現(xiàn)承諾,通知科研人員們對(duì)他們的新設(shè)備進(jìn)行測(cè)試。不過(guò)并不是所有人都認(rèn)可該公司的這第二步棋,因?yàn)樗麄兊玫降臏y(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量并不高,單單靠這些數(shù)據(jù)是不可能獲得完整基因組序列的。

    與此同時(shí),傳統(tǒng)的測(cè)序儀也在飛速地發(fā)展,希望進(jìn)一步降低測(cè)序服務(wù)的成本。比如全世界最大的測(cè)序儀制造商Illumina公司就在今年1月登上了頭條,因?yàn)樗麄冃Q(chēng)將推出一臺(tái)新產(chǎn)品,能夠?qū)€(gè)人基因組測(cè)序的成本降低到1000美元這個(gè)具有重要意義的分界線,因?yàn)楹芏嗳硕颊J(rèn)為如果個(gè)人基因組測(cè)序的費(fèi)用能夠降低到這個(gè)水平,將使測(cè)序成為一項(xiàng)臨床常規(guī)檢測(cè)手段(Science, 17 March 2006, p. 1544)。

    Illumina公司推出的這臺(tái)新設(shè)備與其它新一代測(cè)序儀(next-gen sequencers)一樣,采用的也都是合成測(cè)序策略,即在新DNA鏈合成的時(shí)候檢測(cè)出被添加上的堿基。這些堿基必須加上化學(xué)標(biāo)簽(修飾物),以方便辨認(rèn)。采用這種技術(shù)測(cè)得的片段讀長(zhǎng)都很短,需要進(jìn)行后續(xù)拼接。而牛津納米孔技術(shù)公司采用的測(cè)序策略則完全不同,他們使用的是實(shí)時(shí)測(cè)序方法,讓一根DNA長(zhǎng)鏈穿過(guò)納米級(jí)別的孔徑來(lái)完成測(cè)序。當(dāng)DNA鏈上的堿基通過(guò)納米孔時(shí),它們會(huì)阻斷納米孔中的離子流,而每一種堿基引起的變化都不相同,因此就可以判斷出堿基的序列。從理論上來(lái)說(shuō),這種技術(shù)的測(cè)序讀長(zhǎng)可以達(dá)到數(shù)千bp,不會(huì)產(chǎn)生延遲,也不需要進(jìn)行事后的序列拼接。這項(xiàng)技術(shù)提出距今已經(jīng)過(guò)去了接近20年,最終于2012年成為了現(xiàn)實(shí)。當(dāng)時(shí)牛津納米孔技術(shù)公司提交了一份病毒基因組序列,據(jù)稱(chēng)就是使用納米孔技術(shù)測(cè)得的。

    但為什么后來(lái)就沒(méi)動(dòng)靜了呢?

    據(jù)牛津納米孔技術(shù)公司介紹,這兩年來(lái)他們一直在尋找一種新型的基質(zhì)膜來(lái)為納米孔提供支撐,因?yàn)樽铋_(kāi)始使用的基質(zhì)膜不適宜進(jìn)行大規(guī)模制造。他們也調(diào)整了產(chǎn)品開(kāi)發(fā)策略,放棄了最開(kāi)始計(jì)劃的大型測(cè)序儀開(kāi)發(fā)計(jì)劃,轉(zhuǎn)而投向開(kāi)發(fā)小型手持式、一次性測(cè)序設(shè)備,因?yàn)樗麄兏杏X(jué)這塊市場(chǎng)需求更大。

    美國(guó)馬薩諸塞州博大研究所(Broad Institute in Cambridge, Massachusetts)的David Jaffe在今年也透露一些新進(jìn)展。他們課題組對(duì)大腸桿菌(Escherichia coli)這種常見(jiàn)的細(xì)菌和Scardovia wiggsiae(這是一種與牙齒腐爛相關(guān)的細(xì)菌)細(xì)菌進(jìn)行了基因組測(cè)序,由他們提供DNA樣品,牛津納米孔技術(shù)公司完成了測(cè)序工作。這兩種細(xì)菌的基因組長(zhǎng)度分別為460萬(wàn)bp和155萬(wàn)bp。該工作表明牛津納米孔技術(shù)公司的測(cè)序技術(shù)已經(jīng)從兩年前的病毒基因組水平提升到了細(xì)菌基因組水平。

    但是Jaffe的**也證實(shí)牛津納米孔技術(shù)公司還有很長(zhǎng)的一段路需要走。該公司提供的數(shù)據(jù)證明納米孔測(cè)序技術(shù)的確擁有相當(dāng)大的讀長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),幾乎可以對(duì)一段DNA樣品進(jìn)行完整測(cè)序,一次最多能夠得到10kb的序列。不過(guò)雖然有如此完美的數(shù)據(jù),但是系統(tǒng)誤差卻讓Jaffe等人無(wú)法將這些大片段拼接成完整的基因組序列,而這也是納米孔測(cè)序技術(shù)的終極目標(biāo)。不過(guò)Jaffe等人發(fā)現(xiàn),可以使用這些納米孔測(cè)序數(shù)據(jù)對(duì)常見(jiàn)的Illumina測(cè)序儀獲得的基因組序列進(jìn)行優(yōu)化。美國(guó)馬里蘭州美國(guó)**人類(lèi)基因組研究院(National Human Genome Research Institute in Bethesda, Maryland)的Jeffery Schloss表示,雖然這種技術(shù)還處于初級(jí)階段,但是在某些方面已經(jīng)表現(xiàn)出了很強(qiáng)的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。不過(guò)其他人卻沒(méi)有這么樂(lè)觀,比如加拿大蒙特利爾麥基爾大學(xué)(McGill University in Montreal, Canada)的基因組學(xué)家Ken Dewar就指出,如果納米孔技術(shù)只能夠?qū)ΜF(xiàn)有技術(shù)起到修補(bǔ)作用,那么開(kāi)發(fā)一臺(tái)手持式的納米孔測(cè)序儀有什么意義呢?

    牛津納米孔技術(shù)公司目前正在邀請(qǐng)科研人員們自己來(lái)驗(yàn)證納米孔測(cè)序技術(shù)的實(shí)力。就在Jaffe透露消息的當(dāng)天,該公司就向全世界發(fā)出了電子郵件,邀請(qǐng)數(shù)百位申請(qǐng)者來(lái)體驗(yàn)他們的便攜式測(cè)序儀MinION,只需要繳納1000美元押金即可。首先這些試用者需要先用牛津納米孔技術(shù)公司提供的DNA樣品進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),熟悉儀器操作等流程,然后就可以對(duì)任意的DNA進(jìn)行測(cè)序。

    美國(guó)加州大學(xué)圣克魯茲分校(University of California, Santa Cruz)的David Deamer是納米孔測(cè)序技術(shù)的先驅(qū),他可早就等不及了,他指出,大家可以有很多樣品拿來(lái)試用。我們可要好好地‘虐’一下這臺(tái)儀器。比如有人會(huì)用來(lái)對(duì)食品進(jìn)行快速檢測(cè),看看是否存在有害微生物污染,也有人會(huì)想看看MinION能否測(cè)出古老的DNA。Deamer還想看看這臺(tái)儀器是不是能夠一次讀出16kb的序列。

    就在牛津納米孔技術(shù)公司大肆推介這種低成本的手持式測(cè)序儀的同時(shí),Illumina公司也沒(méi)有坐以待斃,他們決定反其道而行,推出了一款專(zhuān)門(mén)供超大型測(cè)序中心使用的最高級(jí)的測(cè)序儀。就在上個(gè)月,Illumina公司推出了價(jià)值數(shù)百萬(wàn)美元的HiSeq X,這臺(tái)測(cè)序儀在一年的時(shí)間內(nèi)能夠測(cè)得1800個(gè)人的基因組序列,據(jù)該公司介紹,這將使個(gè)人基因組測(cè)序成本下探到1000美元以下,而且耗費(fèi)的人工、儀器折舊和試劑成本都將大幅度降低。據(jù)Illumina公司的市場(chǎng)部高級(jí)經(jīng)理Joel Fellis介紹:“我們看到大規(guī)模測(cè)序的需求在逐年上升。比如英國(guó)就計(jì)劃到2017年時(shí)為全英國(guó)10萬(wàn)人進(jìn)行個(gè)人基因組測(cè)序。”

    不過(guò)事情可沒(méi)有這么簡(jiǎn)單。任何有計(jì)劃購(gòu)買(mǎi)HiSeq X的客戶(hù)必須一次**10臺(tái)以上的設(shè)備,而且必須承諾只能將這些設(shè)備用于個(gè)人基因組測(cè)序。美國(guó)加州大學(xué)圣克魯茲分校的生物工程師Zak Wescoe表示,這已經(jīng)超出了絕大部分科研人員能夠承受的費(fèi)用。而且這些設(shè)備只有滿(mǎn)負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)才能夠?qū)€(gè)人基因組測(cè)序的成本壓低到1000美元的水平。美國(guó)華盛頓大學(xué)基因組研究院(The Genome Institute at Washington University in St. Louis)的副主席Elaine Mardis也認(rèn)為,可沒(méi)有太多地方每年都能夠提供1.8萬(wàn)人的個(gè)人基因組測(cè)序需求,也沒(méi)有這么大的數(shù)據(jù)分析能力,所以Mardis這樣評(píng)價(jià)道:“我不知道有誰(shuí)會(huì)買(mǎi)這些測(cè)序儀。”

    Deanna Church是美國(guó)加利福尼亞洲門(mén)羅公園Personalis公司(Personalis in Menlo Park, California)的基因組學(xué)家,他對(duì)技術(shù)進(jìn)步帶來(lái)的成本降低非常歡迎。他說(shuō)道:“在這塊市場(chǎng)中將出現(xiàn)好幾個(gè)競(jìng)爭(zhēng)者,總有一些技術(shù)會(huì)最終勝出。”


分享到:
  版權(quán)聲明:

  本站所注明來(lái)源為"愛(ài)愛(ài)醫(yī)"的文章,版權(quán)歸作者與本站共同所有,非經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載。

  本站所有轉(zhuǎn)載文章系出于傳遞更多信息之目的,且明確注明來(lái)源和作者,不希望被轉(zhuǎn)載的媒體或個(gè)人可與我們

  聯(lián)系z(mì)lzs@120.net,我們將立即進(jìn)行刪除處理

意見(jiàn)反饋 關(guān)于我們 隱私保護(hù) 版權(quán)聲明 友情鏈接 聯(lián)系我們

Copyright 2002-2024 Iiyi.Com All Rights Reserved